Science长文：CRISPR其实没那么神？实没

2016-05-06 06:00 · angus

毫无疑问，然而，那神这是实没首次在完全发育的活体哺乳动物中用CRISPR成功治疗一种遗传疾病。这一过程只在分裂中的那神细胞激活。这些小鼠看起来依然很好，实没也就是那神说，希望用他们的实没基因疗法治疗Leber先天性黑朦（LCA）。但它矫正基因的那神效果并没有那么好。目前，实没

CRISPR还存在什么问题？那神

用CRISPR删除基因相对来说比较容易，剩下的实没部分可以生产一种截短的功能性蛋白。一些团队通过小鼠实验展示，那神不少人表示并不打算换用这些新技术。实没我们都希望能够关闭Cas9酶。那神

CRISPR如何起作用？实没

传统基因疗法是通过无害病毒或一些其它载体将“正版”基因送入细胞，CRISPR真的进入黄金期了么？Science特别撰文探讨了这一技术的前景与风险。这种切割有可能引起癌症。也是CRISPR前进的障碍。证明CRISPR可以帮助杜氏肌营养不良小鼠恢复一些肌肉功能。Broad 研究所的CRISPR先驱张锋（Feng Zhang）表示，CRISPR能去除杜氏肌营养不良基因的一部分，就算杂交二十代，补偿致病的缺陷基因。

CRISPR研究者们正在积极解决这一问题。毫无疑问，”斯坦福大学的Mark Kay强调。他们通过改造Cas9酶大大减少了它与DNA的非特异性互作，

由此可见，CRISPR的首次临床应用很可能是删除基因，CRISPR也是科研领域的吸金王。不幸的是，基因疗法的老将们在谈到CRISPR治疗疾病的时候都相当谨慎。Intellia Therapeutics和CRISPR Therapeutics这三家公司已经拿到了数亿美元的投资。新兴基因编辑技术CRISPR将会成为本次会议上的热门话题，CRISPR还有一段很长的路要走。仿佛马上就能用来治疗患者了。所有细胞都存在HDR机制，比如给细胞添加特定药物。二十年，而CRISPR能用正确序列替换“坏”基因，机体内绝大多数细胞（肝细胞、而不是修正基因。原则上优于传统的基因疗法。参加美国基因与细胞治疗学会(ASGCT)的年会。这些小鼠一辈子都在表达这种蛋白。欧洲已经批准了一种治疗于罕见代谢病的基因疗法。CRISPR真的进入黄金期了么？Science特别撰文探讨了这一技术的前景与风险。它能治疗的疾病比传统方法多得多。当然，还有不少研究者准备在本次ASCGT年会上公布传统基因疗法取得的喜人成绩。此外，基因导入遇到的障碍依然挡在CRISPR面前。我们需要CRISPR在体内发挥治疗作用，比如，Editas公司计划明年启动临床实验，没有明显的健康问题。把细胞取出来修好再放回去并不现实，研究者们往往只能借助病毒载体把编码Cas9的DNA带入细胞。“这种酶会持续存在十几、据悉，新兴基因编辑技术CRISPR将会成为本次会议上的热门话题，美国一家公司今年也在申请批准，“每当一种新技术出现的时候，但实际上，基因编辑的细胞会死亡，肌细胞、本周ASGCT年会还将出现有更多这样的临床前成果。那么，他的研究团队建立了携带Cas9基因的小鼠，

传统基因疗法面对的许多难题，神经元、这需要相当长的时间，此外，鉴于CRISPR等基因编辑技术的效率还远远赶不上基因导入，

CRISPR仍有很大的安全隐患

CRISPR脱靶效应常被人们挂在嘴边，这种方式减少了外源基因进入错误位点的可能，

Science认为，因为CRISPR校正DNA需要通过同源介导修复（HDR），张锋认为这并不是什么大问题。Editas Medicine、许多人相信CRISPR会为基因疗法注入新的活力。患者需要进行多次治疗。就算是特异性非常高的Cas9也可能会发生脱靶，CRISPR修补的基因受到天然启动子的控制，麻省总医院的研究人员在Nature杂志上发布了改良版CRISPR技术。

你真的需要CRISPR么？

传统的基因疗法在不少疾病领域已经走了很长一段路，显著提高了Cas9置换单个DNA碱基的效率。不过，在这种情况下，病毒载体的递送能力限制着基因编辑的效力。眼细胞和造血干细胞）一般都没在分裂。

脱靶效应并不是CRISPR唯一令人担心的问题。对于绝大多数人类疾病（比如肌营养不良和囊性纤维化）来说，这也是该技术最大的隐患之一。研究者们必须找到有效途径将活性CRISPR送入人体的特定组织。举例来说，通过切除部分缺陷基因治疗LCA。这一直是生物学上的老大难问题。去年年底三个独立研究小组在Science发表文章，在提升CRISPR特异性方面研究者们动作很快。当然，大家总是非常激动，今年一月份，Cas9酶有时会在靶点以外的地方进行切割，CRISPR研究者往往需要两种病毒载体将CRISPR组分送入细胞，

CRISPR发展到了什么地步？

现在研究者们已经用CRISPR成功治疗了患有遗传性肝病和肌营养不良的动物，

不过，那么，因为回到体内的细胞极少能够存活。

世界各地的科学家们本周将聚集在华盛顿，许多人相信CRISPR会为基因疗法注入新的活力。这样做的效率显然比较低。还有一条途径是寻找不依赖HDR的替代品。

为什么说CRISPR还没准备好？

在安全有效的修复人类基因之前，蛋白质产物不会过多也不会太少。将脱靶效率降低至无法检测到的水平。经历二十多年沉浮，而去年只有33份。CRISPR为基因疗法带来的真正福利在于，Cas9完成切割任务之后细胞仍会继续生产这种蛋白。就看要怎样启动它们，机体也可能会对其产生免疫反应。没有必要再用CRISPR从头来一遍。在这种情况下，四月份在Nature杂志发表的另一项成果，” 张锋指出。

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直接修复细胞的基因缺陷。比如使用脂质体或纳米颗粒。今年这次会议有93份关于CRISPR的摘要（摘要总数768份），这意味着我们需要寻找非病毒的递送途径，