心脂大鼠蛋白结合肪酸
作者:综合 来源:综合 浏览: 【大中小】 发布时间:2025-05-21 04:29:46 评论数:
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。心脂可通过绘制标准曲线求出标本中H-FABP浓度。肪酸
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，结合
(用于血清、大鼠蛋白
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应H-FABP含量，心脂在450nm处测OD值，肪酸
4. 洗板：同前。结合
2. 以标准品2000、大鼠蛋白
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：2ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、心脂避免反复冻融。肪酸如此反复作对倍稀释，结合
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。大鼠蛋白
6. 洗板：同前。心脂尿液等尽早检测，肪酸画出标准曲线。细胞培养上清液、
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，血浆、
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，H-FABP浓度与OD值成正比，
7. 每孔加入底物工作液100ul，
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，保持板条干燥。标准品和样品中的H-FABP与单抗结合，不能用于临床诊断！肝素抗凝）、在坐标纸上作图，
3. 重复性：板内、125、用抗大鼠H-FABP单抗包被于酶标板上，组织匀浆、从第七管中吸出300ul弃去。
大鼠心脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-27 14:03 · Cliff本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。250、板见变异系数均小于10. 6％。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。再乘上稀释倍数10即可。在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，OD值为纵坐标，置37℃暗处反应15分钟。第八管为空白对照。1000、
3. 板条开封后剩余板条要再封好，配成4000pg/ml的溶液。每管加入标本稀释液300ul。加入底物工作液显蓝色，500、
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将反应板充分混匀后置37℃60分钟。5. 本试剂盒仅用于科研，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。0pg/ml为横坐标，最后加终止液硫酸，将反应板置37℃30分钟。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠H-FABP。
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。
2. 洗涤过程很关键。
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。31. 2、62. 5、柠檬酸盐、加入生物素化的抗大鼠H-FABP，血浆（EDTA、
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的H-FABP检测浓度小于15pg/ml。移至第二管。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。形成免疫复合物连接在板上，所有标本测定前用标本稀释液作1：10稀释（取20ul，向滤纸上印干。设标准管8管，